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CATH.a神經(jīng)元細(xì)胞 CATH.a(神經(jīng)元細(xì)胞)

【細(xì)胞貨號】 C0188

【細(xì)胞縮寫】 CATH.a細(xì)胞

【細(xì)胞名稱】 CATH.a(神經(jīng)元細(xì)胞)

【背景資料】見細(xì)胞說明書

【細(xì)胞來源】細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、CATH.a神經(jīng)元細(xì)胞promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

【代次】 P4

【規(guī)格】復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

【細(xì)胞數(shù)】 1*10（6）

【生物安全級別】 1

【生物體】小鼠

【組織來源】大腦

【細(xì)胞形態(tài)】神經(jīng)元細(xì)胞

【細(xì)胞特性】貼壁和懸浮混合

【細(xì)胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

【細(xì)胞檢測】細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

【培養(yǎng)條件】詳見細(xì)胞說明書

【傳代方法】建議1:2-1:3 兩天換液一次

【凍存條件】詳見細(xì)胞說明書

【主要文獻(xiàn)】請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

如何收集細(xì)胞進(jìn)行實驗檢測

1、應(yīng)該選用處于對數(shù)生長期，狀態(tài)良好的細(xì)胞用于實驗。

2、細(xì)胞應(yīng)處于70%左右融合，CATH.a神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)飽滿，折光性好。提前24小時換無血清培養(yǎng)基，避免血清干擾，控制細(xì)胞生長速度。

3、選擇適當(dāng)?shù)姆蛛x液，避免所分離的細(xì)胞表面受體和其他標(biāo)記分子被遮蓋。

4、酚紅有類似雌激素作用，為避免類固醇反應(yīng)，某些檢測使用的細(xì)胞要用不加酚紅的培養(yǎng)基。

5、盡量使用傳代數(shù)少的細(xì)胞進(jìn)行實驗，原代培養(yǎng)細(xì)胞建議在10代以內(nèi)用于實驗。

6、在轉(zhuǎn)染實驗中，從細(xì)胞種植到轉(zhuǎn)染后72小時期間，避免使用抗生素。

7、為避免細(xì)胞老化和性狀發(fā)生改變，請及時凍存細(xì)胞。慎重添加生長因子。

8、用于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，轉(zhuǎn)染前一日應(yīng)重新鋪板，密度以鋪滿培養(yǎng)器皿60%左右。轉(zhuǎn)染前4小時重新?lián)Q液。

9、轉(zhuǎn)染后48小時即可進(jìn)行靶基因表達(dá)檢測。

培養(yǎng)基的選擇和使用

MEM：成分簡單，貼壁細(xì)胞首選。

DMEM：分高糖型和低糖型。

IDMEM：適合細(xì)胞密度低，生長困難的細(xì)胞。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng)。

RPM1640：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)首選，主要針對淋巴細(xì)胞，也適合其他細(xì)胞。

199、109培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好。

F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。

F12培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)。

McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長。

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